1.細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史,細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份,參與細胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+...
Ham’sF-12K培養基是Ham’sF-12營養混合物的Kaighn’s改進型,在Ham’sF-12的基礎上提高了氨基酸和**酸的濃度,降低了葡萄糖的用量,并修改了鹽的成分和含量(Konigsbergs)。Ham’sF-12K培養基**初設計用于培養原代人肝細胞以及分化的大鼠和雞的細胞。針對較廣的細胞培養應用,我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養基。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養中所必需的一種營養元素,但其在溶液中不穩定,會自發降解,不含L-谷氨酰胺的培養基,可以根據研究需要任意調整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生...
Waymouth’sMB752/1培養基是由CharityWaymouth研發出來的化學限定培養基,**初用于研究小鼠L株亞細胞系L929細胞在無血清條件下的營養、代謝和生長特性的研究。 Waymouth’sMB752/1培養基現已被拓展用于完整***以及其他許多細胞系的培養,如*細胞系的培養。 華晨陽所生產的細胞培養基含有多類細胞培養所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分,但不含蛋白質、脂類或任何生長因子,有些細胞的培養可能需要搭配血清使用。 注意事項 本產品經過濾除菌,使用時應注意無菌操作,避免污染; 為保持本產品的比較好使用效果,請勿進行凍融處理; ...
Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一種高級細胞培養添加劑,可直接替代細胞培養基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養中所必需的一種營養素,但其在溶液中不穩定,會自發降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對細胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩定,不會自發的降解。細胞利用其機制是:在細胞培養時,細胞會逐漸向培養液中釋放一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細胞會將這兩種水解產物吸收利用。細胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養策略相似,連續的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入...
RPMI-1640細胞培養基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發出來的,RPMI是該研究所開發的一類細胞培養基,1640是培養基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養基,使用碳酸氫鹽緩沖系統,與大多數哺乳動物細胞培養基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養基常用初是為淋巴細胞培養專門設計的,現在已廣泛應用于各種正常細胞和ai細胞的培養,包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞和a...
Grace’s昆蟲培養基是由Grace改良的Wyatt培養基,該培養基與昆蟲血淋巴的化學成分更為相近,Grace使用這種培養基成功建立了***個昆蟲連續細胞系。Grace’s昆蟲培養基**初用于澳大利亞白星橙天蠶蛾(Anthereaeucalypti)細胞的培養,適當補充添加劑后,Grace’s昆蟲培養基可用于培養各種昆蟲細胞,包括多種鱗翅類以及一些雙翅類昆蟲的細胞。本產品含有多類細胞培養所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分,但不含蛋白質、脂類或任何生長因子,故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。Grace’s補充昆蟲細胞培養基**初設計用于澳大利亞白星橙天蠶蛾(Antherea...
Dulbecco’s改良培養基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養基的基礎上研制的,與MEM培養基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。DMEM培養基初設計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現已廣泛應用于各種細胞的培養。HEPES是一種優良的生物緩沖劑,對細胞無毒性作用,添加HEPES的培養基能夠較長時間保持恒定的PH范圍,可以有效的防止培養液PH波動較大對細胞生長產生不利的影響。可用于無CO2培養箱。酚紅在培...
Dulbecco’s改良培養基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養基的基礎上研制的,與MEM培養基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子等。DMEM培養基初設計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現已廣泛應用于各種細胞的培養。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,其中,青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結合,抑制細菌蛋白質的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對革蘭氏...
Fischer’s培養基是GlenFischer在美國國家**研究所設計的,初用于小鼠白血病細胞的培養。現在主要用于造血細胞的培養,如淋巴母細胞和淋巴細胞的培養。本產品含有多類細胞培養所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分,但不含蛋白質、脂類或任何生長因子,故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。注意事項本產品經過濾除菌,使用時應注意無菌操作,避免污染;為保持本產品的較好使用效果,請勿進行凍融處理;本產品用于科研或進一步研究使用,不用于診斷和***。MEM α 培養基不含核苷和脫氧核苷的MEM α培養基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細胞的篩選培養基。福建RPMI-1640細胞培養基源頭直...
L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養中所必要的一種營養,但其在溶液中不安定,會自發降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對細胞危害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中格外的安定,不會自發的降解。細胞運用其機制是:在細胞培訓時,細胞會日益向培養液中獲釋一種肽酶,將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺,而后細胞會將這兩種水解產物吸收運用。細胞運用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養方針相像,連續的將低濃度水準的L-谷氨酰胺加入到培養液中,從而提高了L-谷氨酰胺的利用率,且不會生成剩余的氨,更有利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以取而代之等摩爾的L-谷氨酰胺,適用于所...
可在血清含量低時用,適用于克隆化培養。F12適用于CHO細胞,也是無血清細胞培養基中常用的基礎細胞培養基。DMEM/F12細胞培養基將DMEM和F12按照1:1比例混合,混合后營養成份豐富,血清使用量也減少。常作為開發無血清細胞培養基時的基礎細胞培養基。與天然培養基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代,因此,細胞培養中使用合成培養基時必須加入一定量的天然培養基成分,以克服合成培養基的不足。普遍的做法是添加5~10%的血清,這樣才能維持細胞活力,促進細胞增殖。針對不同的動物細胞,現已開發了多種商業化、個性化的低血清細胞培養基配方,營養成份更加豐富,血清使用量可降低至1~3...
Leibovitz’sL-15培養基的緩沖系統由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成,代替了傳統的碳酸氫鈉緩沖系統,同時,用半乳糖和**酸鈉代替葡萄糖可以防止酸性代謝副產物的形成,有助于維持培養液PH的穩定,適合用于非CO2平衡環境的細胞培養。Leibovitz’sL-15培養基適用于猴腎細胞和HEP-2的培養、原代(如胚胎和成人組織)細胞分離、多種病毒的培養以及神經元的培養等。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養中所必需的一種營養元素,但其在溶液中不穩定,會自發降解,不含L-谷氨酰胺的培養基,可以根據研究需要任意調整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于...
Ham’sF-12營養混合物(Ham’sF-12NutrientMixture)Ham’sF-12營養混合物(Ham’sF-12NutrientMixture)是由Ham在1969年以Ham’sF-10營養混合物為基礎設計而成的,初用于CHO細胞的無血清培養。Ham’sF-12常作為無血清培養的基礎培養液,在低血清含量下時,特別適合單細胞培養和克隆化培養,添加血清后也廣泛應用于細胞和原代細胞的培養,如大鼠肝細胞、大鼠前列腺上皮細胞、軟骨細胞、大鼠成肌細胞、雞胚胎細胞等。此外,Ham’sF-12與DMEM等體積混合后,得到的DMEM/F12培養基營養更為豐富,使用更為較廣。Ham’s...
RPMI-1640培養基常初是為淋巴細胞培養專門設計的,現在已廣泛應用于各種正常細胞和ai細胞的培養,包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞和ai細胞,是使用常為廣的培養基之一。RPMIRPMI1640培養基相比其他培養基之所以具有獨特的效果,是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。 L-丙氨酰-L-谷氨酰可以代替等摩爾的L-谷氨酰胺,適用于所有的細胞,幾乎無需適應,并且可以延長細胞的培養時間,減少傳代次數,即節省了時間也節約了金錢。與添加L-谷氨酰胺的培養基中培養的細胞相比,活性降低得更慢。延滯期略微延長的原因是肽酶的釋放...
RPMI-1640細胞培養基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發出來的,RPMI是該研究所開發的一類細胞培養基,1640是培養基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養基,使用碳酸氫鹽緩沖系統,與大多數哺乳動物細胞培養基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養基常用初是為淋巴細胞培養專門設計的,現在已廣泛應用于各種正常細胞和ai細胞的培養,包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞和a...
III)細胞系的大規模連續培養。該培養基主要用于培養和維護鱗翅類衍生細胞系和擴增這些細胞系的病毒。IPL-41培養基基礎也以用于無血清夜蛾細胞的桿狀病毒重組蛋白表達。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。目前用于細胞培養的血清主要是牛血清,培養某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。牛血清對絕大多數哺乳動物細胞都是適合的,但并不排除在培養某種細胞時使用其他動物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,這些物質對...
其本質為含有鹽、氨基酸、維生素和其他必需營養物的pH緩沖的等滲混合物。在此基礎上,DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各種合成細胞培養基被不斷開發出來。常用合成培養基的配方此處不詳細介紹。MEM(MinimalEssentialMedium)培養基MEM(MinimalEssentialMedium)培養基有含Earle's平衡鹽的類型,也有含Hanks'平衡鹽的類型;有高壓滅菌型的,也有過濾除菌型的;還有含非必需氨基酸的類型。是基本、適用范圍廣的細胞培養基。DMEM細胞培養基DMEM(Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium)是...
DMEM 培養基具備多種實用配方,以滿足不同細胞的生長需求。其中,高糖型(葡萄糖濃度 4500mg/L)和低糖型(葡萄糖濃度 1000mg/L)為常見。高糖型 DMEM 培養基猶如為代謝旺盛的細胞量身定制,為其提供充足的能量來源,促使細胞快速生長、增殖,尤其適用于像腫瘤細胞這類生長迅猛、對能量需求高的細胞。而低糖型 DMEM 培養基則更契合代謝較為緩慢的細胞,為它們營造溫和穩定的生長環境,保障細胞正常代謝與功能維持,在細胞培養過程中,科研人員可依據細胞特性靈活選用合適配方。McCoy’s 5A培養基是Thomas McCoy等人在1959年設計的培養基,初專門用于Novikoff Hepato...
可在血清含量低時用,適用于克隆化培養。F12適用于CHO細胞,也是無血清細胞培養基中常用的基礎細胞培養基。DMEM/F12細胞培養基將DMEM和F12按照1:1比例混合,混合后營養成份豐富,血清使用量也減少。常作為開發無血清細胞培養基時的基礎細胞培養基。與天然培養基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代,因此,細胞培養中使用合成培養基時必須加入一定量的天然培養基成分,以克服合成培養基的不足。普遍的做法是添加5~10%的血清,這樣才能維持細胞活力,促進細胞增殖。針對不同的動物細胞,現已開發了多種商業化、個性化的低血清細胞培養基配方,營養成份更加豐富,血清使用量可降低至1~3...
生物藥物生產過程中,DMEM 培養基扮演著關鍵角色。在單克隆抗體生產環節,科研人員利用 DMEM 培養基培養雜交瘤細胞,使其大量增殖并分泌高純度的單克隆抗體。在疫苗生產方面,DMEM 培養基用于培養病毒抗原,如流感疫苗生產中,通過在 DMEM 培養基中培養流感病毒,獲取足夠的病毒抗原,進而制備出安全有效的流感疫苗。此外,一些重組蛋白藥物的生產也依賴 DMEM 培養基培養的細胞,這些細胞在培養基提供的營養環境下,高效表達出具有***價值的重組蛋白,為患者帶來希望。MEM培養基(Minimum Essential Medium)也稱比較低必需培養基、小基本培養基或低限量Eagle培養基。云南醫用細...
RPMI-1640細胞培養基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發出來的,RPMI是該研究所開發的一類細胞培養基,1640是培養基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養基,采用碳酸氫鹽緩沖系統,與大多數哺乳動物細胞培養基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養基**初是為淋巴細胞培訓專門設計的,現在已普遍應用于各種正常細胞和惡性**的培養,包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞和惡...
細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史,細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份,參與細胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的B...
MEMα是一種改良的MEM培養基,與MEM培養基相比MEMα培養基營養更為豐富,在MEM的基礎上又添加了NEAA、**酸鈉、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分,廣泛應用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞的培養。不含核苷和脫氧核苷的MEMα培養基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細胞的篩選培養基。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一種高級細胞培養添加劑,可直接替代細胞培養基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養中所必需的一種營養素,但其在溶液中不穩定,會自發降解生成氨和焦谷氨酸,其...
Ham’sF-12K培養基是Ham’sF-12營養混合物的Kaighn’s改進型,在Ham’sF-12的基礎上提高了氨基酸和**酸的濃度,降低了葡萄糖的用量,并修改了鹽的成分和含量(Konigsbergs)。Ham’sF-12K培養基**初設計用于培養原代人肝細胞以及分化的大鼠和雞的細胞。針對較廣的細胞培養應用,我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養基。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養中所必需的一種營養元素,但其在溶液中不穩定,會自發降解,不含L-谷氨酰胺的培養基,可以根據研究需要任意調整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生...
Ham’sF-12K培養基是Ham’sF-12營養混合物的Kaighn’s改進型,在Ham’sF-12的基礎上提高了氨基酸和**酸的濃度,降低了葡萄糖的用量,并修改了鹽的成分和含量(Konigsbergs)。Ham’sF-12K培養基**初設計用于培養原代人肝細胞以及分化的大鼠和雞的細胞。針對較廣的細胞培養應用,我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養基。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養中所必需的一種營養元素,但其在溶液中不穩定,會自發降解,不含L-谷氨酰胺的培養基,可以根據研究需要任意調整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生...
培養液的滲透壓是一個非常重要的因素,細胞通常可耐受260mOsm/kg~320mOsm/kg。標準培養液的滲透壓在此范圍內波動。特別注意:向培養液中加入其它物質有可能會明顯改變培養液的滲透壓,特別是溶于強酸或強堿中的物質。向培養液中添加HEPES時需按以下方法調節鈉離子濃度。緩沖系統大多數細胞所需pH在-。但是,細胞培養適pH值隨培養的細胞種類不同而不同。成纖維細胞喜歡較高pH(-),而傳代轉化細胞系則需要偏酸pH(-)。由于多數培養液靠碳酸氫鈉(NaHCO3)與CO2體系進行緩沖,因此,氣相中的CO2濃度應與培養液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養箱空氣中CO2濃度設定在5%,培養...
CMRL培養基是由康諾特醫學研究室(ConnaughtMedicalResearchLaboratories)設計出來的,初用于L細胞(Earle)的無血清培養。CMRL培養基添加馬血清或小牛血清后,特別適用于猴腎細胞的克隆培養以及其他哺乳動物細胞系的培養。本產品含有多類細胞培養所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分,但不含蛋白質、脂類或任何生長因子,故此產品需搭配血清或無血清添加物使用。注意事項本產品經過濾除菌,使用時應注意無菌操作,避免污染;為保持本產品的比較好使用效果,請勿進行凍融處理;本產品用于科研或進一步研究使用,不用于診斷和。McCoy’s 5A常用于多種類型的原代細胞的培養,如骨...
Dulbecco’s改良培養基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養基的基礎上研制的,與MEM培養基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。DMEM培養基**初設計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現已廣泛應用于各種細胞的培養。針對***的細胞培養應用,我們提供多種組分的DMEM改良培養基。高糖型培養基普遍應用于生長快、粘附性低的細胞、雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞、DNA轉染的轉化細胞、各種原代病毒宿主細胞、單一細...
RPMI-1640細胞培養基已廣泛應用于各種正常細胞和ai細胞的培養,包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞和ai細胞,是使用較廣的培養基之一。 HEPES是一種優良的生物緩沖劑,對細胞無毒性作用,添加HEPES的培養基能夠較長時間保持恒定的PH范圍,可以有效的防止培養液PH波動較大對細胞生長產生不利的影響。可用于無CO2培養箱。酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續監測培養液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養液呈黃色,而較高的PH值時使培養液呈紫色,PH值~,常適合細胞培養。但酚紅也有一些缺點,研究表明酚紅可以模擬固醇類...
Dulbecco’s改良培養基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養基的基礎上研制的,與MEM培養基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及酸鈉。DMEM培養基*初設計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現已廣泛應用于各種細胞的培養。針對較廣的細胞培養應用,我們提供多種組分的DMEM改良培養基。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,是體外培養中為預防微生物污染*常用的,其中,青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別...