Ham’sF-12K培養基是Ham’sF-12營養混合物的Kaighn’s改進型,在Ham’sF-12的基礎上提高了氨基酸和**酸的濃度,降低了葡萄糖的用量,并修改了鹽的成分和含量(Konigsbergs)。Ham’sF-12K培養基**初設計用于培養原代人肝細胞以及分化的大鼠和雞的細胞。針對較廣的細胞培養應用,我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養基。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養中所必需的一種營養元素,但其在溶液中不穩定,會自發降解,不含L-谷氨酰胺的培養基,可以根據研究需要任意調整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養基的基礎上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天(門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能降低細胞培養時細胞自身生產非必須氨基酸的副作用,有效促進細胞增殖代謝。 Dulbecco’s 改良培養基增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。海南醫用細胞培養基廠家
其本質為含有鹽、氨基酸、維生素和其他必需營養物的pH緩沖的等滲混合物。在此基礎上,DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各種合成細胞培養基被不斷開發出來。常用合成培養基的配方此處不詳細介紹。MEM(MinimalEssentialMedium)培養基MEM(MinimalEssentialMedium)培養基有含Earle's平衡鹽的類型,也有含Hanks'平衡鹽的類型;有高壓滅菌型的,也有過濾除菌型的;還有含非必需氨基酸的類型。是基本、適用范圍廣的細胞培養基。DMEM細胞培養基DMEM(Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium)是由Dulbecco在MEM培養基的基礎上改良獲得的,各成分份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)兩種類型。細胞生長快。附著稍差的腫瘤細胞、克隆培養用高糖效果較好,常用于雜交瘤的骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞培養。IMDM細胞培養基IMDM(Iscove’smodifiedDMEM)是由Iscove在DMEM基礎上改良,增加了幾種氨基酸和胱氨酸量等??捎糜陔s交瘤細胞培養,以及無血清培養的基礎細胞培養基。RPMI-1640細胞培養基專門針對淋巴細胞培養設計,含有BSS、21種氨基酸、維生素等,適于多種正常細胞和腫瘤細胞的培養,也用做懸浮細胞培養。HamF12細胞培養基含微量元素。浙江樣本細胞培養基源頭直供DMEM/F12培養基常作為開發無血清培養基的基礎,也適用于低血清含量下哺乳動物細胞的培養以及克隆密度培養。
RPMI-1640培養基常初是為淋巴細胞培養專門設計的,現在已廣泛應用于各種正常細胞和ai細胞的培養,包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞和ai細胞,是使用常為廣的培養基之一。RPMIRPMI1640培養基相比其他培養基之所以具有獨特的效果,是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。
L-丙氨酰-L-谷氨酰可以代替等摩爾的L-谷氨酰胺,適用于所有的細胞,幾乎無需適應,并且可以延長細胞的培養時間,減少傳代次數,即節省了時間也節約了金錢。與添加L-谷氨酰胺的培養基中培養的細胞相比,活性降低得更慢。延滯期略微延長的原因是肽酶的釋放和二肽的消化需要一定的時間。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養基的基礎上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天。門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能降低細胞培養時細胞自身生產非必須氨基酸的副作用,有效促進細胞增殖代謝。
細胞培養基的種類按照細胞培養基的發展歷史,細胞培養基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養基、合成細胞培養基、無血清細胞培養基、限定化學成分細胞培養基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細胞滲透壓平衡,保持pH穩定及提供簡單的營養。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份,參與細胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結團。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎溶液,前者緩沖能力較弱,適合于密閉培養;后者緩沖能力較強,適合于5%CO2的培養條件。表1-1幾種常用的BSS配方。即用型DMEM/F12,確保細胞活力與實驗結果可靠性。
DMEM 培養基在組織工程領域也展現出廣闊的應用前景。在構建組織工程支架時,可將細胞與 DMEM 培養基混合后接種于支架材料上,DMEM 培養基為細胞提供生長所需營養,促使細胞在支架上黏附、增殖并分化,逐漸形成具有特定功能的組織。例如,在骨組織工程研究中,利用 DMEM 培養基培養成骨細胞,將其接種到生物可降解支架上,有望構建出具有生物活性的人工骨組織,為骨缺損修復提供新的***策略,為組織工程技術的臨床應用奠定基礎。保障細胞培養實驗順利進行RPMI-1640培養基初是為淋巴細胞培養專門設計的,現在已應用于各種正常細胞ai細胞的培養。湖北正規細胞培養基供應商
M199有兩種平衡鹽成分,Earle’s鹽成分常用于CO2環境,Hank’s鹽成分用于非CO2的環境。海南醫用細胞培養基廠家
任意調節葡萄糖的濃度,簡便快捷。高糖型培養基廣泛應用于生長快、粘附性低的細胞、雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞、DNA轉染的轉化細胞、各種原代病毒寄主細胞、單一細胞的培養以及疫苗的生產,例如運用CHO細胞表述EPO和生產乙肝疫苗。低糖培養基更適宜代謝效用較慢、依賴性貼壁細胞的培養。HEPES是一種優良的海洋生物緩沖劑,對細胞無毒性效用,添加HEPES的培養基能夠較長時間維持恒定的PH范圍,可以有效性的以防培養液PH波動較大對細胞生長產生不利于的影響??捎糜跓oCO2培養箱。酚紅在培養基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續監測培養液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養液呈黃色,而較高的PH值時使培養液呈紫色,PH值~,**適宜細胞培養。但酚紅也有一些弱點,研究說明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的功用,因此在用到雌***敏感的細胞時(如乳腺組織),**好用到不含酚紅的培養基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外,一些無血清培養基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀抵消。青霉素-鏈霉素混合液一般而言也被稱做“雙抗”,是體外培養中為防止微生物污染**常用的***,其中,青霉素能夠擾亂細菌細胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效性。海南醫用細胞培養基廠家
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