光譜儀和分光光度計有什么區別?
使用光譜進行定性分析的儀器叫做光譜儀。 使用分光棱鏡或者光柵產生光譜,并利用其中特定的某個或某段光譜線強度來進行定量分析的儀器叫做分光光度計。這兩種叫法基本沒差別,光譜儀都是要有分光組件的,比如ICP-AES, AAS。 但是歷史上因為中國上海精密儀器廠首先將紫外可見分光光度計進行了國產化,當時的技術難點也就在分光技術上。老一代的分析員都是把紫外可見分光光度計直接稱作分光光度計,所以分光光度計也特指紫外可見分光光度計。而熒光光譜儀、核磁共振光譜儀、掃描隧道光譜儀其實也是要有分光組件的,現在都是用光譜儀這個名詞來統稱了,因此光譜儀的概念比分光光度計范圍要大一些,新一些。而分光光度計更集中在定量分析方面的稱呼,有人把AES、AAS也稱作分光光度計因為它們在一般性的分析工作中也主要是用來定量的,這就造成了“分光光度計”和“光譜儀”兩種叫法的混亂。
蛋白質在280nm波長處有較大吸光值。江西高靈敏度超微量分光光度計試用
包括波長范圍為400~760 nm的可見光區和波長范圍為200~400 nm的紫外光區。不同的光源都有其特有的發射光譜,因此可采用不同的發光體作為儀器的光源。
鎢燈的發射光譜:鎢燈光源所發出的400~760nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后,可得到由紅橙,黃綠,藍靛,紫組成的連續色譜;該色譜可作為可見光分光光度計的光源。
氫燈(或氘燈)的發射光譜:氫燈能發出185~400 nm波長的光譜可作為紫外光光度計的光源。
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江西性能穩定超微量分光光度計核酸檢測測試在紫外區有吸收的樣品時用石英比色皿。
Micro Drop快速啟動操作:
1. 雙擊軟件圖標,并在功能鍵中選擇感興趣的軟件應用。
2. 輸入樣品編號。
3. 用干凈的無塵紙擦干凈上下基座,用合適的液體建立空白對照,空白對照液體是溶解目標分子的液體。
空白對照液體的pH值和離子濃度應和檢測樣品一樣。
基座模式:取1-2μl空白對照加到基座上,放下檢測臂,勾選基線校正,點擊空白檢測鍵。
比色皿模式:插入比色皿時注意儀器上箭頭指示方向。光束(2mm寬)位置在比色皿底部以上8.5mm的位置,請按照比色皿生產廠家的建議加入液體。
比色皿的正確使用方法 在使用比色皿時,兩個透光面要完全平行,并垂直置于比色皿架中,以保證在測量時,進射光垂直于透光面,避免光的反射損失,保證光程固定。 比色皿有方向性。有些比色皿上標有方向標記,無方向標記的比色皿應予以校正,校正時要先確定方向并作好標記,以減少測定誤差。比色皿的校正方法是:將純凈的蒸餾水注入比色皿中,把其中吸收*小的比色皿的吸光度置為零,并以此為基準,測出其它比色皿的相對吸光度。同一組比色皿相互間的差異應小于測定誤差在測定同一溶液時,吸光度差值應小于0.5%,否則應對差值進行校正。
MicroDrop使用長壽命氙燈,滑動軸承結構的升降檢測基座,確保檢測的穩定性和儀器的使用壽命。
超微量分光光度計比色法測定蛋白質濃度:
蛋白質通常是多種蛋白質的化合物,比色法測定的基礎是蛋白質構成成分:氨基酸(如酪氨酸,絲氨酸)與外加的顯色基團或者染料反應,產生有色物質。有色物質的濃度與蛋白質反應的氨基酸數目直接相關,從而反應蛋白質濃度。
比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry等幾種方法。
Lowry法:以**早期的Biuret反應為基礎,并有所改進。蛋白質與Cu2+反應,產生藍色的反應物。但是與Biuret相比,Lowry法敏感性更高。缺點是需要順序加入幾種不同的反應試劑;反應需要的時間較長;容易受到非蛋白物質的影響;含EDTA,Tritonx-100等物質的蛋白不適合此種方法。
A260/A280:是核酸純度的指示值。云南雙檢測模式超微量分光光度計樣品檢測
不同物質的吸收光譜是不同的.因此根據吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質。江西高靈敏度超微量分光光度計試用
分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
單色光輻射穿過被測物質溶液時,被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比,其關系如下式:
A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc
式中 :A 為吸光度;
I0為入射的單色光強度;
I 為透射的單色光強度;
T 為物質的透射率;
k 為摩爾吸收系數;
L 為被分析物質的光程,即比色皿的邊長;
c 為物質的濃度;
物質對光的選擇性吸收波長,以及相應的吸收系數是該物質的物理常數。當已知某純物質在一定條件下的吸收系數后可用同樣條件將該供試品配成溶液,測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質的含量。在可見光區,除某些物質對光有吸收外,很多物質本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多,且常使用單色光純度較差的儀器,故測定時應用標準品或對照品同時操作。
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