所含化學(xué)成分明確,無動物源性成分,可一步實(shí)現(xiàn)細(xì)胞凍存并長期在-80℃冰箱保存,保護(hù)細(xì)胞免受冰晶和溶質(zhì)損傷,適用于大多數(shù)常規(guī)細(xì)胞。LiveCyteTM(LC-1602)是原代細(xì)胞及干細(xì)胞**凍存液,可進(jìn)一步提高原代細(xì)胞和干細(xì)胞凍存效率。產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)1、省去繁瑣的降溫步驟,可直接放置于-80°C冰箱,節(jié)省時(shí)間和精力。2、即用型,無需現(xiàn)配,操作方便,可減少實(shí)驗(yàn)中因操作引起的污染。3、在多種哺乳細(xì)胞系中經(jīng)過性能驗(yàn)證,其復(fù)蘇率和活率達(dá)90%以上。無血清凍存液特性:適合各種動物細(xì)胞。寧波正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液平均價(jià)格
細(xì)胞凍存中的注意事項(xiàng):細(xì)胞凍存開始時(shí),要溫好相應(yīng)的培養(yǎng)基和相應(yīng)的試劑,以及計(jì)數(shù)耗材,避免操作過程中手忙腳亂。用移液管吹打相應(yīng)的胞液時(shí),要保證移液管在液面以下吹打,管內(nèi)要有液體,防止產(chǎn)生相應(yīng)的氣泡,氣泡的張力會影響細(xì)胞的活率和生存狀態(tài)。計(jì)數(shù)細(xì)胞時(shí)要保證取胞液時(shí)也要混勻,這個過程比較重要,細(xì)胞不混勻,計(jì)數(shù)不準(zhǔn),此外吹打應(yīng)該輕柔,避免細(xì)胞在吹打的過程中出現(xiàn)了相應(yīng)的死亡。凍存離心用50ml離心管比較好,加凍存液吹打混勻比較方便,離心后不能過多地晃動離心管。當(dāng)離心管液體較多的時(shí)候,可以直接傾倒,不要磕,多余的液體較好用泵吸出比較好。凍存支數(shù)少的情況,用泵頭輕柔吹打,避免出現(xiàn)氣泡,凍存支數(shù)多用移液管吹打。北京無血清細(xì)胞凍存液生產(chǎn)廠家無血清細(xì)胞凍存液產(chǎn)品性能:胎牛血清取自牛,因此,難以應(yīng)用到需要避免接觸動物源的應(yīng)用領(lǐng)域。
細(xì)胞凍存液是如何保護(hù)細(xì)胞的:細(xì)胞這一微小的生命體和地球的其它生命相似,機(jī)體的主要成份是由液態(tài)的H2O組成,但是其結(jié)構(gòu)微小復(fù)雜,內(nèi)部任何的物理損傷對于它都是致命的。水在低于零度的條件下會結(jié)冰。如果將細(xì)胞懸浮在純水中,隨著溫度的降低,細(xì)胞內(nèi)外的水份都會結(jié)冰,所形成的冰晶會造成細(xì)胞膜和細(xì)胞器的破壞而引起細(xì)胞死亡,這種因細(xì)胞內(nèi)部結(jié)冰而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為細(xì)胞內(nèi)冰晶的損傷。如果將細(xì)胞懸浮在溶液中,隨著溫度的降低,細(xì)胞外部的水分會首先結(jié)冰,從而使得未結(jié)冰的溶液中電解質(zhì)濃度升高。如果將細(xì)胞暴露在這樣高溶質(zhì)的溶液中且時(shí)間過長,細(xì)胞膜上脂質(zhì)分子會受到損壞,細(xì)胞便發(fā)生滲漏,在復(fù)溫時(shí),大量水分會因此進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),造成細(xì)胞死亡。這種因保存溶液中溶質(zhì)濃度升高而導(dǎo)致的細(xì)胞損傷稱為溶質(zhì)損傷或稱溶液損傷。
細(xì)胞凍存秘籍:細(xì)胞凍存對于大多數(shù)動物細(xì)胞,通常每分鐘下降-1至-3℃。控制冷卻過程的較好方法是使用程序降溫系統(tǒng)。如果沒有程序降溫系統(tǒng),可以使用程序降溫盒,然后將其置于-70℃至-90℃冰箱中過夜。雖然這種方法適用于許多細(xì)胞系,但不能提供可控的,均勻的或可重復(fù)的冷卻,不建議用于珍貴細(xì)胞。無論使用哪種冷卻方法,重要的是快速高效地將其傳輸?shù)捷^終存儲位置。如果轉(zhuǎn)移不能立即完成,可以將小瓶置于干冰上一段時(shí)間。這樣可以避免在轉(zhuǎn)移過程中發(fā)生溫度升高而損害細(xì)胞。在這個轉(zhuǎn)移過程中溫度升高是解凍后影響細(xì)胞活力的主要原因。反復(fù)吹吸混勻后,分裝于細(xì)胞凍存管中,每管500ul-1000ul。
凍存細(xì)胞注意事項(xiàng):冷凍保護(hù)劑可降低培養(yǎng)基的冰點(diǎn),并可減緩冷卻速度,較大降低冰晶形成的危險(xiǎn)(冰晶可損傷細(xì)胞,導(dǎo)致細(xì)胞死亡)。注:DMSO可促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。操作含DMSO的試劑時(shí),應(yīng)采用與此類物質(zhì)安全危害相適應(yīng)的設(shè)備和操作規(guī)范,并應(yīng)按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)處置此類試劑。建議可使用廠商生產(chǎn)的無血清細(xì)胞凍存液,使用方便,復(fù)蘇率高。注意冷凍保護(hù)劑DMSO的品質(zhì):DMSO應(yīng)為試劑級等級,無菌且無色,以5-10ml小體積分裝,4℃避光保存,勿作多次解凍。無血清細(xì)胞凍存液:一些保護(hù)劑,易于穿透細(xì)胞,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞。無錫正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液銷售廠家
清洗細(xì)胞,充分洗凈殘留凍存液。寧波正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液平均價(jià)格
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。在過去的幾十年中,科研工作者將培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例配制成凍存液,并配合手工使細(xì)胞從4℃,-20℃,-80℃到液氮中逐步轉(zhuǎn)移使其達(dá)到“慢凍”的效果。但這種自制的凍存液儲存時(shí)間一般比較短,不能滿足時(shí)間跨度大的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的需求。且這樣人力和時(shí)間成本大,人手操作的誤差和血清制品的批間差也給實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來了不穩(wěn)定性。寧波正規(guī)無血清細(xì)胞凍存液平均價(jià)格