RPMI-1640細胞培養基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所（RoswellParkMemorialInstitute,RPMI）開發出來的，RPMI是該研究所開發的一類細胞培養基，1640是培養基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養基，使用碳酸氫鹽緩沖系統，與大多數哺乳動物細胞培養基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養基常用初是為淋巴細胞培養專門設計的，現在已廣泛應用于各種正常細胞和ai細胞的培養，包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞和ai細胞，是使用常用為比較多的培養基之一。RPMIRPMI1640培養基相比其他培養基之所以具有獨特的效果，是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。RPMI1640培養基含有生物素、維生素B12以及PABA，這些成分是Eagle’sMEM和DMEM所不具備的。針對細胞培養應用，我們提供多種組分的RPMI1640改良培養基。添加HEPES的培養基能較長時間保持恒定的PH范圍，可有效的防止培養液PH波動較大對細胞生長產生不利的影響。江蘇iclean細胞培養基

    無血清培養基中通常需要添加一些額外的組分，才能幫助細胞貼壁生長，包括以下幾大類物質：1）促貼壁物質：一般為細胞外基質，如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子，對許多細胞的繁殖和分化，起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化，這些細胞包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、CHO細胞、成肌細胞等。2）促生長因子：針對不同細胞添加不同的生長因子。也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質，有些是許多細胞必不可少的，如胰島素。3）酶抑制劑：培養貼壁生長的細胞，需要用胰酶消化傳代，在無血清培養基中需含酶抑制劑，以終止酶的消化作用，達到保護細胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑。4）結合蛋白和轉運蛋白：常見如轉鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大，可增加培養基的粘度，保護細胞免受機械損傷。許多旋轉式培養的無血清培養基都含有牛血清白蛋白。5）微量元素：硒是常見的。江蘇iclean細胞培養基RPMI-1640是改進型的McCoy ‘s 5A培養基，使用碳酸氫鹽緩沖系統。

    L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養中所必要的一種營養，但其在溶液中不安定，會自發降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨對細胞危害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中格外的安定，不會自發的降解。細胞運用其機制是：在細胞培訓時，細胞會日益向培養液中獲釋一種肽酶，將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后細胞會將這兩種水解產物吸收運用。細胞運用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養方針相像，連續的將低濃度水準的L-谷氨酰胺加入到培養液中，從而提高了L-谷氨酰胺的利用率，且不會生成剩余的氨，更有利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以取而代之等摩爾的L-谷氨酰胺，適用于所有的細胞，幾乎無須適應，并且可以延長細胞的培養時間，縮減傳代次數，即節約了時間也節省了錢財。與添加L-谷氨酰胺的培養基中培訓的細胞相比之下，活性減低得更慢。延滯期稍為延長的緣故是肽酶的釋放和二肽的消化需一定的時間。NEAA（非須要氨基酸），是在MEM培養基的基本上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能下降細胞培育時細胞自身生產非須要氨基酸的副作用，有效性推動細胞增殖代謝。葡萄糖可以根據研究需。

    MEMα是一種改良的MEM培養基，與MEM培養基相比MEMα培養基營養更為豐富，在MEM的基礎上又添加了NEAA、**酸鈉、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分，廣泛應用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞的培養。不含核苷和脫氧核苷的MEMα培養基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細胞的篩選培養基。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺（Alanyl-glutamine，Ala-Glu），又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽，是一種高級細胞培養添加劑，可直接替代細胞培養基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺（Glutamine）是細胞培養中所必需的一種營養素，但其在溶液中不穩定，會自發降解生成氨和焦谷氨酸，其中氨對細胞有害；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩定，不會自發的降解。細胞利用其機制是：在細胞培養時，細胞會逐漸向培養液中釋放一種肽酶，將L-丙氨酰-L-谷氨酰水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，而后細胞會將這兩種水解產物吸收利用。細胞利用L-丙氨酰-L-谷氨酰的過程與流加培養策略相似，連續的將低濃度水平的L-谷氨酰胺加入到培養液中，從而提高了L-谷氨酰胺的利用率，且不會生成多余的氨，更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰可以代替等摩爾的L-谷氨酰胺，適用于所有的細胞，幾乎無需適應。 DMEM 培養基擁有多種配方，低葡萄糖濃度（1g/L）的配方，溫柔呵護對高糖敏感的細胞。

    其本質為含有鹽、氨基酸、維生素和其他必需營養物的pH緩沖的等滲混合物。在此基礎上，DMEM、IMDM、HAMF12、PRMI1640等各種合成細胞培養基被不斷開發出來。常用合成培養基的配方此處不詳細介紹。MEM（MinimalEssentialMedium）培養基MEM（MinimalEssentialMedium）培養基有含Earle's平衡鹽的類型，也有含Hanks'平衡鹽的類型；有高壓滅菌型的，也有過濾除菌型的；還有含非必需氨基酸的類型。是基本、適用范圍廣的細胞培養基。DMEM細胞培養基DMEM（Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium）是由Dulbecco在MEM培養基的基礎上改良獲得的，各成分份量加倍，分低糖（1000mg/L）、高糖（4500mg/L）兩種類型。細胞生長快。附著稍差的腫瘤細胞、克隆培養用高糖效果較好，常用于雜交瘤的骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞培養。IMDM細胞培養基IMDM（Iscove’smodifiedDMEM）是由Iscove在DMEM基礎上改良，增加了幾種氨基酸和胱氨酸量等。可用于雜交瘤細胞培養，以及無血清培養的基礎細胞培養基。RPMI-1640細胞培養基專門針對淋巴細胞培養設計，含有BSS、21種氨基酸、維生素等，適于多種正常細胞和腫瘤細胞的培養，也用做懸浮細胞培養。HamF12細胞培養基含微量元素。MEMα是一種改良的MEM培養基，在MEM的基礎上又添加了NEAA、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分。湖北醫用細胞培養基批發廠

Dulbecco’s 改良培養基與MEM培養基相比，氨基酸的含量增加了2倍，維生素的含量增加了4倍。江蘇iclean細胞培養基

在細胞培養實驗里，DMEM 培養基的使用過程需嚴謹規范。收到培養基后，應及時存放于 2-8°C 的環境中，低溫可有效減緩培養基內成分的降解速度，確保其營養成分的穩定性。在使用前，需將培養基預熱至 37°C，模擬人體體溫環境，讓細胞在適宜溫度下開啟生長旅程。同時，由于 DMEM 培養基多采用碳酸氫鈉緩沖系統，需將培養環境的 CO?濃度維持在 5 - 10%，以此精細調控培養基的 pH 值處于 7.2 - 7.4 的生理適宜區間，為細胞打造穩定且舒適的 “居住空間”，促進細胞健康生長。江蘇iclean細胞培養基

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