1.細胞培養(yǎng)基的種類按照細胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史，細胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養(yǎng)基、合成細胞培養(yǎng)基、無血清細胞培養(yǎng)基、限定化學成分細胞培養(yǎng)基等幾大種類。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細胞滲透壓平衡，保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細胞膜的重要組成成份，參與細胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細胞結(jié)團。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液，前者緩沖能力較弱，適合于密閉培養(yǎng)；后者緩沖能力較強，適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。天然培養(yǎng)基指來自動物體液或利用組織分離提取的一類培養(yǎng)基，如血漿、血清、雞胚浸出液等。其優(yōu)點是營養(yǎng)成分豐富，培養(yǎng)效果良好，但缺點是成分復(fù)雜，來源受限且制作過程復(fù)雜、批間差異大。目前使用的天然培養(yǎng)基是血清，另外各種組織提取液、促進細胞貼壁的膠原類物質(zhì)在培養(yǎng)某些特殊細胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白經(jīng)蛋白酶和肽酶水解的產(chǎn)物。Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基適用于猴腎細胞和HEP-2的培養(yǎng)、原代細胞分離、多種病毒的培養(yǎng)以及神經(jīng)元的培養(yǎng)等。陜西實驗細胞培養(yǎng)基

    Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成，代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)，同時，用半乳糖和**酸鈉代替葡萄糖可以防止酸性代謝副產(chǎn)物的形成，有助于維持培養(yǎng)液PH的穩(wěn)定，適合用于非CO2平衡環(huán)境的細胞培養(yǎng)。Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基適用于猴腎細胞和HEP-2的培養(yǎng)、原代（如胚胎和成人組織）細胞分離、多種病毒的培養(yǎng)以及神經(jīng)元的培養(yǎng)等。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”，是體外培養(yǎng)中為預(yù)防微生物污染常用的***，其中，青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成，對革蘭陽性菌特別有效；而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結(jié)合，抑制細菌蛋白質(zhì)的合成，對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效，但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預(yù)防絕大部分的細菌污染。本產(chǎn)品含有多類細胞培養(yǎng)所需的氨基酸、維生素、無機鹽等多種成分，但不含蛋白質(zhì)、脂類或任何生長因子，故此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用。 河北細胞培養(yǎng)基供應(yīng)商Dulbecco’s 改良培養(yǎng)基–DMEM（Dulbecco’s Modified Eagle Medium）現(xiàn)已廣應(yīng)用于各種細胞的培養(yǎng)。

    可在血清含量低時用，適用于克隆化培養(yǎng)。F12適用于CHO細胞，也是無血清細胞培養(yǎng)基中常用的基礎(chǔ)細胞培養(yǎng)基。DMEM/F12細胞培養(yǎng)基將DMEM和F12按照1:1比例混合，混合后營養(yǎng)成份豐富，血清使用量也減少。常作為開發(fā)無血清細胞培養(yǎng)基時的基礎(chǔ)細胞培養(yǎng)基。與天然培養(yǎng)基相比，有些天然的未知成分尚無法用已知的化學成分所替代，因此，細胞培養(yǎng)中使用合成培養(yǎng)基時必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分，以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的做法是添加5~10%的血清，這樣才能維持細胞活力，促進細胞增殖。針對不同的動物細胞，現(xiàn)已開發(fā)了多種商業(yè)化、個性化的低血清細胞培養(yǎng)基配方，營養(yǎng)成份更加豐富，血清使用量可降低至1～3%，由此可減少了血清等動物來源成份對生物制品安全性的影響。無血清細胞培養(yǎng)基（serumfreemedium，SFM）經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后，無血清培養(yǎng)基和無血清培養(yǎng)成為當今細胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大趨勢。采用無血清培養(yǎng)可降低生產(chǎn)成本，簡化分離純化步驟，避免病毒污染造成的危害。無血清培養(yǎng)基，一般是在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，加入成份完全明確的或部分明確的血清替代成份，達到既能滿足動物細胞培養(yǎng)的要求，又能有效克服使用血清所帶來問題的目的。

    無血清培養(yǎng)基中通常需要添加一些額外的組分，才能幫助細胞貼壁生長，包括以下幾大類物質(zhì)：1）促貼壁物質(zhì)：一般為細胞外基質(zhì)，如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子，對許多細胞的繁殖和分化，起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化，這些細胞包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質(zhì)細胞、CHO細胞、成肌細胞等。2）促生長因子：針對不同細胞添加不同的生長因子。也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質(zhì)，有些是許多細胞必不可少的，如胰島素。3）酶抑制劑：培養(yǎng)貼壁生長的細胞，需要用胰酶消化傳代，在無血清培養(yǎng)基中需含酶抑制劑，以終止酶的消化作用，達到保護細胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑。4）結(jié)合蛋白和轉(zhuǎn)運蛋白：常見如轉(zhuǎn)鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大，可增加培養(yǎng)基的粘度，保護細胞免受機械損傷。許多旋轉(zhuǎn)式培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基都含有牛血清白蛋白。5）微量元素：硒是常見的。TNM-FH昆蟲培養(yǎng)基可用于各種鱗翅類昆蟲細胞的培養(yǎng)。含有多類細胞培養(yǎng)所需的氨基酸、無機鹽等多種成分。

在細胞培養(yǎng)實驗里，DMEM 培養(yǎng)基的使用過程需嚴謹規(guī)范。收到培養(yǎng)基后，應(yīng)及時存放于 2-8°C 的環(huán)境中，低溫可有效減緩培養(yǎng)基內(nèi)成分的降解速度，確保其營養(yǎng)成分的穩(wěn)定性。在使用前，需將培養(yǎng)基預(yù)熱至 37°C，模擬人體體溫環(huán)境，讓細胞在適宜溫度下開啟生長旅程。同時，由于 DMEM 培養(yǎng)基多采用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)，需將培養(yǎng)環(huán)境的 CO?濃度維持在 5 - 10%，以此精細調(diào)控培養(yǎng)基的 pH 值處于 7.2 - 7.4 的生理適宜區(qū)間，為細胞打造穩(wěn)定且舒適的 “居住空間”，促進細胞健康生長。高糖 DMEM 適合生長快、粘附低的細胞，如腫瘤細胞的培養(yǎng) 。江蘇樣本細胞培養(yǎng)基供應(yīng)商家

Fischer’s培養(yǎng)基不含蛋白質(zhì)、脂類或任何生長因子，故此產(chǎn)品需搭配血清或無血清添加物使用。陜西實驗細胞培養(yǎng)基

    動物細胞培養(yǎng)（animalcellculture）就是從動物機體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個細胞（使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶）然后，放在適宜的培養(yǎng)基中，讓這些細胞生長和增殖。細胞培養(yǎng)基的種類有哪些？按照細胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史，細胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細胞培養(yǎng)基、合成細胞培養(yǎng)基、無血清細胞培養(yǎng)基、限定化學成分細胞培養(yǎng)基等幾大種類。DMEM（Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium）是由Dulbecco在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上改良獲得的，各成分份量加倍，分低糖（1000mg/L）、高糖（4500mg/L）兩種類型。細胞生長快。附著稍差的腫瘤細胞、克隆培養(yǎng)用高糖效果較好，常用于雜交瘤的骨髓瘤細胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細胞培養(yǎng)。2.神經(jīng)元基礎(chǔ)培養(yǎng)基可為神經(jīng)元生長提供基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì)。IPL-41昆蟲培養(yǎng)基（IPL-41InsectMedium）旨在用于大規(guī)模擴增草地貪夜蛾（Spodopterafrugiperda）細胞系，也常用于通過桿狀病毒表達系統(tǒng)（BEVS）進行蛋白表達。IPL-41培養(yǎng)基是對原始IPL配方的改良，由美國農(nóng)業(yè)部昆蟲病理實驗室Weiss等人開發(fā)，用于大規(guī)模擴增草地貪夜蛾衍生細胞系。Weiss向基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入了胎牛血清和TPB培養(yǎng)基（TryptosePhosphateBroth），成功地實現(xiàn)了IPL-21AE。陜西實驗細胞培養(yǎng)基

深圳市華晨陽科技有限公司是一家致力于核酸檢測、分子診斷、醫(yī)學檢驗、病毒檢測等產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、銷售于一體的國家高新技術(shù)企業(yè)。公司擁有二十多項**，部分專利已經(jīng)轉(zhuǎn)化應(yīng)用于市場。產(chǎn)品主要應(yīng)用于基因檢測、醫(yī)療機構(gòu)、生物制藥、大型甲等醫(yī)院、出入境檢驗檢疫、診斷試劑、疾控機構(gòu)、刑偵法醫(yī)鑒定等。近年來，公司不斷加大自主研發(fā)投入，積極引進人才和技術(shù)，并與國內(nèi)外多家科研機構(gòu)、醫(yī)學檢驗所以及三甲醫(yī)院、基因檢測公司、疾病預(yù)防控制中心等科研機構(gòu)有著緊密合作，促進人類健康產(chǎn)業(yè)大發(fā)展。